程颖：循环细胞在小细胞白血病临床研究中的进展

循环巨噬细胞( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“容器恶性肿瘤遗骸”，已在重新分配性癌症、癌和结直肠癌中都最常用肾功能高度评价。小巨噬细胞前列腺癌(Small celllung cancer，SCLC)的组织遗骸来源不足，且忽视合理的天气预报发作重新分配和预报肾功能的生物学标志物。近十年统计分析者CTCs在SCLC中都的诊疗系统设计展开了探究性统计分析，辨认出CTCs对SCLC的病因、分段，天气预报发作、重新分配，检验、肾功能以及成立个体化用药方案等具重要意味，本文就CTCs在SCLC诊疗系统设计中都的统计分析进展为由综述。

一、SCLC病变CTCs的精确测量方规

CTCs的精确测量方规主要有流式巨噬细胞精确测量新技术( fluocytometry，FCM)、逆转录一聚合酶链重排(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统、CTC芯片(CTC-chip)新技术和膜滤过分离巨噬细胞新技术(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其中都CellSearch系统因其半自动化的操作平台，较高的免疫、依赖性和可重复性，沦为最最常系统设计的CTCs精确测量方规。

早在2004年，Allard等率先系统设计CelISearch规精确测量了99举例前列腺癌（并未列举SCLC举例数）病变的CTCs，随后Nagrath等换用CTC-chip规精确测量了55举例前列腺癌病变外周滴血C TCs。2009年之后的统计分析多换用CeIISearch规精确测量SCI．C病变外周滴血CTCs，然而该方规由于对忽视上皮巨噬细胞特点的巨噬细胞会用到漏检可能会，且与免疫磁珠及抗体结合的CTCs无规行某些紧接著的精确测量，诊疗系统设计受到受限。

近十年，随着纳米科技产业的演进，小分子CTCs微小标志物的免疫辨识分f修饰的纳米材料结合薄流控新技术的CTCs精确测量平台的统计分析受到相当多关心，2013年，《自然》（Nature）杂志将CTCs纳米精确测量选为最具创新性和转化潜力的病因新方规，成果功不可没。但就目前来看，现阶段的CTCs精确测量方规各有利弊，并未有统计分析确认哪种方规对SCLC的CTCs精确测量更有优势。着眼并愿景，十分困难联合开发免疫、依赖性更佳的CTCs精确测量新技术，为SCLC的基石和诊疗统计分析带来冲破。

二、CTCs在SCLC诊疗系统设计中都的统计分析现状

（一）CTCs小数与SCLC的病因、分段

近十年多项统计分析推测CTCs小数水准与SCLC的病因、分段有亲密关系0 2009年Tanaka等系统设计CeIISearch规精确测量了1 50举例7.5ml外周滴血CTCs，其中都前列腺癌1 25举例、非恶性25举例，前列腺癌病变还包括116举例非小巨噬细胞前列腺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9举例SCLC。

统计分析整体而言SCLC病变CTCs阳性率为66.70-/0（6举例／9举例），明显略低于NSCLC病变的CTCs阳性率(腺癌25.9%，鳞癌40.9%；腺癌对比SCLC，P

同年，Hou等系统设计CeIISearch规精确测量了50举例初治的SCLC病变外周滴血CTCs，还包括20举例受限期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病变和30举例相当多期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病变，水准线期ED-SCLC及LD-SCLC病变的中都位CTCs小数大致相同237和2个/7.5ml滴血，7举例并未检出CTCs的病变仅为LD-SCLC，证明CTCs小数水准与SCLC分段相关。

相似的结论在2012年被日本精研术界Naito等确认，统计分析者在51举例SCLC病变中都立用CeIISearch规精确测量水准线期CTCs水准，整体而言ED-SCLC,病变的中都位CTCs小数为9.5个f 7.5ml滴血，而LD-SCLC仅为1个／7.51111滴血，有利于证明ED-SCLC病变的CTCs水准略低于LD-SCLC病变。

（二）CTCs检验SCLC的及肾功能

CTCs是否可作为检验SCLC和肾功能的有救指称f,瓶统计分析者们一直在阐释的情况。Houi等在2009年通过CellSearch规精确测量了50举例SCLC病变(LD-SCLC20举例，ED-SCLC30举例)的CTCs，辨认出CTCs>300个/7.5ml滴血的病变及CTCs

水准线期CTCs>=50和

在该统计分析中都SCLC病变的肾功能界定差值游戏内8个/7.5ml滴血，以此将病变分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年或多或少系统设计CellSearch规精确测量59举例SCLC病变在水准线期、1间隔复发后及4间隔复发之前后外固滴血CTCs水准，其中都ED-SCLC病变38举例，LD-SCLC病变2 1举例c水准线期有43举例病变(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml滴血，CTCs>215个/7.5ml滴血和CTCs

经过1间隔复发后病变CTCs水准减缓，且1间隔复发后CTCs

统计分析者推断CTCs水准是SCLC肾功能的单独直接影响因子，其中都1间隔复发后CTCs水准是SCLC和肾功能最强的预报因子。

2013年ASCO发表文章的ECOG1508统计分析中都，统计分析者尝试在155举例ED-SCLC中都加入小分子用药，并对其中都123举例病变水准线期CTCs展开精确测量，整体而言小分子用药并未能延长ED-SCLC病变的PFS和OS，但辨认出水准线期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml滴血的mPFS大致相同4.4和4.3个年底（P=0.07），OS大致相同10.7和7.2个年底(P=0.01)。统计分析者并不认为虽然小分子用药没能增加ED-SCLC病变的PFS和OS，但却辨认出了CTCs可能会是SCLC病变的肾功能标志物。

最近，Igawa等尝试系统设计OBP-401试制精确测量SCLC病变外周滴血CTCso系统设计OBP-401试制精确测量癌症和前列腺癌病变CTCs的相关统计分析已有中期报道。统计分析纳入30举例韧治的SCLC病变，29举例病变(96%)外周滴血CTCs阳性。在水准线期，21举例病变CTCs

（三）CTCs天气预报SCLC的发作和重新分配

现阶段的统计分析说明了通过精确测量CTCs的用到来天气预报SCLC的发作和重新分配具重要的诊疗意味o Tanaka等统计分析辨认出CTCs水准‘j 125举例前列腺癌病变（还包括9举例SCLC病变）进展明显相关，特别是与恰好重新分配亲密（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据集，作者并不认为CTCs可作为天气预报前列腺癌恰好重新分配的生物学标记物。Natio等统计分析辨认出SCLC在水准线期、用药之前后及发作后CTCs的阳性率大致相同68.6%、26.5%和67.6，提示SCLC发作后外周精研CTCs水准升高，牵涉到恰好重新分配各部位的比率为0、1和>=2的病变其中都位CTCs小数大致相同2.0、7.5和21个/7.5ml滴血,提示CTCs水准与恰好重新分配各部位的比率有关，恰好重新分配趋多，CTCs小数趋高（p

三、CTCs在SCLC诊疗系统设计中都的探究方向

发作和重新分配是导致病变用药失败和死亡的主要缘故，第一时间辨认出的发作和重新分配并采敢积极合理的用药措施可特别是在增加病变生存率。然而，由于SCLC忽视能够天气预报发作和重新分配的生物学标志物，且原则上影像精研核对无规辨认出薄重新分配灶及薄小残留病灶，导致牵涉到发作和重新分配的SCLC病变不能第一时间接受病因和用药。

诊疗中都部分LD-SCLC的病变肾功能差异较大，提示有些受限期的病变在病因时可能会已牵涉到了影像精研不能辨认出的薄重新分配而沦为潜在的相当多期病变。通过精确测量外周滴血CTCs的用到及比率变化从而对SCLC病变精子状态展开实时、动态地天气预报和高度评价，第一时间辨认出的发作、重新分配，将有助诊疗医生对用药时机的把握和用药作法的选择，但究竟CTCs的比率或变化差值为多少时能够简单反映SCLC的发作或重新分配由此可知不明确，需要更多的循证医精研证明为由支持。

CTCs在检验SCLC病变用药方面的系统设计由此可知处于探究阶段，用药更进一步中都CTCs比率的变化与SCLC病变复发的相关性及其与SCLC病变放疗时机的选择等情况在并愿景需大量的诊疗统计分析。近5年，对CTCs是否可作为SCLC病变肾功能指称标的统计分析逐渐增多，但SCLC最佳的肾功能CTCs界定差值由此可知无定论，争议颇多。

其中都3项来自Hou、Naito、Hiltermann的统计分析将SCLC的肾功能CTCs畀定差值分别游戏内为50、8和2个／7.5ml滴血，差异很大，这可能会与统计分析换用的统计精研方规并不相同以及入组样本量较少有关。并愿景会意大利精研术界Normanno等论者将ED-SCLC和LD-SCLC病变连在一起统计分析，对水准线期、l间隔复发后CTCs以及用药前后CTCs的变化差值分别游戏内肾功能界定差值，为并愿景的统计分析获取了在此之后基本概念。笔者所在的科研团队也正致力于必先SCLC病变肾功能最佳CTCs界定差值的统计分析，结果令人期待。

的个体化用药是用药模式的演进方向。SCLC病变对复发药品的重排存在明显的个体差异，其主要缘故可能会与十分复杂的关联性、基因序列表达差异及多态性有关。所以，逐步明晰SCLC的原核生物学精研特点对实现似乎意味上的SCLC个体化用药尤为重要。并愿景会必先精研术界王洁等统计分析人员通过系统设计单巨噬细胞基因序列DNA目的对病变单个CTC展开全原核生物学、外显子原核生物学DNA。

在此项统计分析中都，谢晓亮教授发明的多重退火和环化循环的缩减新技术(MAIBAC)，尝试实现了对病变外周滴血单个CTC的全原核生物学缩减和深度DNA，在单个巨噬细胞水准精确测量全原核生物学基因序列拷贝数表征(CNVs)和单核苷酸表征(SNVs)o单巨噬细胞水准CTCs原核生物学DNA新技术可第一时间获取如致病突变等个体化用药所需的重要信息，同时也为并愿景SCLC小分子药品的联合开发获取新技术开发。

SCLC的组织遗骸难以获取，受限了紧接著各项核对和统计分析的进行，而来进行CTCs构建的SCLC循环巨噬细胞移植瘤( CTC-derived explants，CDXs)模型，有望应付这一迫切课题。最近，Hodgkinson等尝试将6举例ED-SCLC病变lOml外周滴血中都的CTCs提取后注射到免疫缺陷小鼠皮下，结果在4只小鼠人身过渡到了CDXs，证明SCLC病变的CTCs具致瘤性。

同时系统设计CelISearch规精确测量这6举例SCLC病变的CTCs，整体而言尝试过渡到CDXs的4举例病变的CTCs小数仅>400个／7.5ml滴血，而另外2举例并未过渡到CDXs的病变其CTCs小数大致相同222和20个／7.5ml滴血，提示SCLC的CTCs致瘤性与外周滴血CTCs教量有关。有利于统计分析辨认出整体而言于复发依赖性SCLC，复发致病性SCLC病变的CDXs倍增间隔时间短、土壤更进一步。对3举例CDXs给予顺铂和遥相呼应泊苷复发药品，其依赖性左至右为CDX3>CDX2>CDX4，除此以外病变的OS大致相同9.7.3.5.0.9个年底，提示对CDXs展开活体药敏试制可以间接重排病变生存间隔时间。

该统计分析推测部分SCLC的外周滴血CTCs具干巨噬细胞特性，可展开活体培养、过渡到与原发高度相似的CDXs，为SCLC病变的活体药敏试制、致病组态统计分析等一系列核对和统计分析获取了发挥作用的的组织，应付了SCLC病变遗骸来源不足的情况。

结论

从现行的统计分析可以看出，虽然CTCs在SCLC中都的诊疗系统设计仍处于探究阶段，但前景广阔。目前，诸多转化性统计分析正在展开中都，相信随着统计分析的不断深入，CTCs有望沦为SCLC的冲破口，期待CTCs在SCLC的领域中都为我们带来惊喜。

编辑： 雪